猪病诊断从临床解剖走向实验室检测

酷暑将至,正是高热病高发期。为了解猪群对蓝耳病、圆环病等的抵抗力情况,目前有不少养殖场会定期做抗原抗体检测。不过养殖户发现送检同一血样到不同的实验室,结果有时会完全不同,让人难于理解。农业部种猪质检中心基因分析室(以下简称测定中心)主任樊福好认为,血样污染或是实验室操作失误都会出现上述情况,其中血样在运输过程中出现腐败或溶血、脂血是最常见的情况。所以对猪群做抗原抗体检测,对血样正确保存尤为重要。除此之外,养殖户亦可选择做健康指数评估。

养殖户青睐抗体普查

4月初,存栏380头能繁母猪的广东省江门市莲塘猪场负责人陈广润,对不同生长阶段的猪群分别采集部分血样,送到广东省农科院兽医研究所做例行猪病抗体检测。陈广润透露,每当季节变换或疫情不稳定时,做猪群抗体检测已成为该猪场的例行工作,目的是评估猪群的健康水平。

据广东省农科院兽医研究所猪病室工作人员蔡汝健介绍,近年来,大中型规模养殖场(年存栏100头母猪以上)越来越重视猪群抗体水平定期普查工作,主要做猪瘟、伪狂犬、蓝耳抗体的检测,大概一年两次;而小猪场通常会在疫情不稳定或出现问题时送检。

南海狮山狮北猪场黄家仁认为,大猪场因人才素质会比小猪场高一些,对检测技术接受程度高,所以猪场抗体普查会多做一些;而小猪场因资金和技术力量有限,对检测结果分析不明、不透,对生产指导意义不大,所以对抗体普查认可度不高。

新兴食品企业集团有限公司副总经理麦志介绍说,该公司每年投入抗体普查的费用巨大,主要以监测种猪群为主,大约以15%比例抽检。麦志透露,该公司主要将血样送检到测定中心或兽医所和大华农新兴研发中心。据了解,猪瘟抗体检测收费在10元/份左右,伪狂犬抗体20元/份、蓝耳抗体50元/份,而病毒的检测每份50元~100元不等。

近年来,由于抗体普查技术的普及,不少商家亦看中了这一领域的市场。不少兽药经销型企业也开始上马此项目。比如河源康而健动物保健品有限公司,2008年建立了猪病实验室诊疗室,为客户提供抗体检测服务。而在试剂盒市场上,2010年继各大厂家推出圆环疫苗之后,天津瑞普生物技术股份有限公司在国内首个推出圆环抗体检测试剂盒,以角逐诊断试剂市场。

血样污染易导致检测失败

虽然抗体检测技术不断成熟,但也常发生检测失败的情况。同一血样送到不同的实验室,其结果有时完全不同。不少养殖户反映:不知道该相信哪个结果。

樊福好分析,血样污染或是实验室操作失误都会导致监测失败,其中血样在运输过程中出现腐败或溶血、脂血是最常见的情况。当然各个实验室的设备不同,其灵敏度也会不同。樊福好认为,只要操作正确,对猪群监测结果判定不会有太大的偏差。

至于血样的保存,是当前一大难题。樊福好介绍,该中心研制出一种血液保护液,该保护液采用的是非化学防腐剂,使血样不易发生污染与腐败,能延长血液的保存时间。采血时只需要抽取同体积的保护液,混合均匀,之后连同注射器一并送到实验室即可。樊福好介绍,在对比试验中,使用过血液保护的样品无论是抗原检测还是抗体检测,其结果都准确许多。

目前血液保护液是免费提供给送检场。樊福好说,同时因1∶1添加了血液保护液,对血样进行了前期稀释,因此可以减少ELISA实验中的血样稀释步骤或稀释倍数,节约了试剂成本。樊福好透露,他们正打算申请血液保护液的专利权。

健康指数评估受关注

樊福好认为,除了上述因素影响检测结果之外,在目前日益复杂的国内养殖环境里,一味地追求对抗原、抗体的检测、监测其指导意义已经下降,因为无法从中找到最需要的原发性病原。

勃林格殷格翰贸易有限公司华南区技术服务经理方树河也认为,国内猪群疫病感染压力较大,许多猪都处于亚健康状态;病毒与抗体处于一种动态平衡当中。所以检测到猪体有某种病毒只能说明机体带毒,但不能说该场有这个病。

所以我们建议对猪群做健康指数评估。樊福好说,健康指数评估主要包括五方面:营养、中毒、免疫抑制、炎症和败血,也被简称为两对半检测。出现问题后一味地考虑病毒或细菌原因是个错误的思维,往往有时候问题就出在营养或管理等外部客观原因上。樊福好认为,有时疾病是做了替罪羊而已。

至于目前养殖户关心的圆环疫苗抗体监测问题,樊福好认为,圆环抗体检测试剂盒还不是很成熟,稳定性以及重复性较差。如果要评估疫苗的效果,最好做对比实验。以前我做过对比实验,一组免疫某进口圆环疫苗,一组不免疫;40天后的差异是非常显著的。蔡汝健也认为,检测圆环抗体水平的高低意义不大,主要看抗体均匀、整齐度。